ஜர்னல் ஆஃப் புரோட்டியோமிக்ஸ் & பயோ இன்ஃபர்மேடிக்ஸ்
திறந்த அணுகல்

சுருக்கம்

ஒரு இழை பூஞ்சையின் சுரக்கும் புரதங்களை பிரித்தெடுப்பதற்கான ஒரு திறமையான முறை, கிரிஃபோனெக்ட்ரியா ஒட்டுண்ணி

ஜின்சி வாங், ஃபாங்சென் வாங், ஜின்ஜி ஷாங் மற்றும் பாயோஷன் சென்

திரவ ஊடகத்தில் வளர்க்கப்பட்ட கிரிஃபோனெக்ட்ரியா ஒட்டுண்ணிப் பூஞ்சையிலிருந்து சுரக்கும் புரதங்களைப் பிரித்தெடுப்பதற்கு மூன்று வெவ்வேறு முறைகள் மதிப்பீடு செய்யப்பட்டன. ஒவ்வொரு முறையிலும் தயாரிக்கப்பட்ட புரத மாதிரிகள் SDS-PAGE மற்றும் இரு பரிமாண ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் (2-DE) க்கு உட்படுத்தப்பட்டன. சுரக்கும் புரதங்களை பிரித்தெடுப்பதற்கு அல்ட்ராஃபில்ட்ரேஷன் பொருத்தமானதல்ல என்று கண்டறியப்பட்டது. அம்மோனியம் சல்பேட் மழைப்பொழிவைத் தொடர்ந்து குளோரோஃபார்ம் சிகிச்சை மூலம் தயாரிக்கப்பட்ட புரத மாதிரிகள் 2-DE பிரிப்பிற்கு ஏற்கத்தக்கவை. அதிக மகசூல் மற்றும் சிறந்த தரம் கொண்ட சுரக்கும் புரதங்களை பிரித்தெடுப்பதற்கு மாற்றியமைக்கப்பட்ட கழிவுநீர் முறை சிறந்தது. 3 நாள் பழமையான கலாச்சாரத்திலிருந்து இந்த முறையில் தயாரிக்கப்பட்ட புரத மாதிரிகளைப் பயன்படுத்தி 2-DE ஜெல்லில் சுமார் 300 புரத புள்ளிகளை அடையாளம் காண முடியும். உயர்தர சுரக்கும் புரதங்களை வெற்றிகரமாக தனிமைப்படுத்துவது பூஞ்சை சுரக்கும் புரோட்டீமின் பகுப்பாய்விற்கான முன் கோரிக்கையாகும். புதிய முறை மற்ற இழை பூஞ்சைகளுக்கு, குறிப்பாக நோய்க்கிருமிகளுக்குப் பயன்படுத்தப்படலாம்.