குளோபல் ஜர்னல் ஆஃப் லைஃப் சயின்சஸ் மற்றும் உயிரியல் ஆராய்ச்சி
திறந்த அணுகல்

சுருக்கம்

தாவர அறிவியல் 2017: தூண்டக்கூடிய தளம்-குறிப்பிட்ட ரீகாம்பினேஸ் மற்றும் ஒரு இருசெயல் தேர்ந்தெடுக்கக்கூடிய மரபணுவைப் பயன்படுத்தி மார்க்கர் இல்லாத டிரான்ஸ்ஜெனிக் தக்காளி மற்றும் ஆப்பிள் செடிகளின் உற்பத்தி - வாடிம் டைமர்பேவ் - ஷெம்யாகின் இன்ஸ்டிடியூட் கிளை

வாடிம் டைமர்பேவ், செர்ஜி டோல்கோவ் மற்றும் டாட்டியானா மிதியோச்கினா

பரம்பரையாகக் கட்டப்பட்ட தாவர வகைகளின் அளவு விரிவாக்கம் மற்றும் அவற்றின் வெளிப்படையான பண நடைமுறையைப் பொருட்படுத்தாமல், இத்தகைய அறுவடைகள் சமூகத்தால் மனதளவில் ஒப்புக் கொள்ளப்படுகின்றன, முக்கியமாக தொலைதூர வாழ்க்கை வடிவங்களிலிருந்து (நுண்ணிய உயிரினங்கள், நோய்த்தொற்றுகள் மற்றும் பலவற்றின் வெளிப்புற பரம்பரை பொருட்கள் போன்றவை. .) டிரான்ஸ்ஜெனிக் தாவரங்களில் இலக்கு குணங்களை அறிவிப்பதற்காக மற்றும் நச்சு எதிர்ப்பு மற்றும் களைக்கொல்லிகள். இந்த நிலைமைகளின் கீழ், புதிய ஆழமான நன்மை பயக்கும் வகையிலான விளைச்சலை வெளிப்புற மரபுவழி பொருட்கள் இல்லாமல், அடிப்படையில் பாக்டீரியா தொடக்க புள்ளிகள் இல்லாமல், மற்றும் தொற்று எதிர்ப்பு எதிர்ப்பு குணங்கள் இல்லாமல், இது இல்லாதது ஊக்கமளிக்கும் செயல்முறைகளுக்கு தனித்துவமான அவநம்பிக்கை அளிக்கப்படுகிறது. பரம்பரையாக சரிசெய்யப்பட்ட வாழ்க்கை வடிவங்களை திறந்த கட்டமைப்பிற்குள் வெளியேற்றவும், குறிப்பாக GMO உடன் அடையாளம் காணப்பட்ட சந்தேகத்திற்குரிய இடங்களில், எடுத்துக்காட்டாக, ஐரோப்பிய ஒன்றியம்.

மிக சமீபத்திய தசாப்தத்தில், குறிப்பான் உயிரினங்கள் இல்லாமல் பெறுவதற்கான நுட்பங்கள் அசாதாரண முக்கியத்துவத்தைப் பெற்றுள்ளதால், பெரும்பாலான ஆய்வுகள் புதிய கண்டுபிடிப்புகள் மற்றும் திசையன் கட்டமைப்புகளை மேம்படுத்துவதற்கு வழங்கப்படுகின்றன. இந்த வேலையில், தொல்லை தரும் டிஎன்ஏவை வெளியேற்றுவதற்கு, pMF வெக்டார்களுடன் (பிளாண்ட் ரிசர்ச் இன்டர்நேஷனல், Wageningen, Netherlands) இடத்தைக் கொண்ட ஒரு தள-வெளிப்படையான மறுசீரமைப்பைப் பயன்படுத்தினோம் (Schaart et al., 2004). இந்த கட்டமைப்பின் அடிப்படை விருப்பமான நிலை அதன் தொடர்ச்சியான இரு மடங்கு தேர்வு ஆகும். அக்ரோபாக்டீரியம்-பரிந்துரைக்கப்பட்ட மாற்றத்திற்குப் பிறகு முதன்மை நிலை, நுண்ணுயிர் எதிர்ப்பிகளைப் பயன்படுத்தி மீளுருவாக்கம் செய்வதைத் தீர்மானிப்பதாகும், எடுத்துக்காட்டாக, கனமைசின், ஹைக்ரோமைசின் அல்லது பாஸ்பினோட்ரிசின், மேலும் டிஎன்ஏ குழுக்களை மேலும் அகற்றுவது, குறைபாடற்ற மறுசீரமைப்பு இலக்குகளால் (RS) நிகழ்கிறது. ரீகாம்பினேஸ் R இன் துவக்கம், அது பார்வைக்குள் செயலிழக்கப்படுகிறது ஒரு குளுக்கோகார்ட்டிகாய்டு ஏற்பியின் தசைநார் கட்டுப்படுத்தும் பகுதி (LBD). டெக்ஸாமெதாசோனின் (டெக்ஸ்) பதிலில் தாவர திசுக்களை அடைகாத்த பிறகு அதன் இயக்கம் நிறைவடைகிறது. 5-ஃப்ளோரோசைட்டோசின் (5-எஃப்சி) கொண்ட ஒரு ஊடகத்தின் மேலும் தேர்வு, கோடா தரம் கொண்ட தாவர திசுக்களின் மேம்பாட்டை தடுக்கிறது (சைட்டோசின் டீமினேஸ் நச்சுத்தன்மையற்ற 5-எஃப்சியை விட சைட்டோடாக்ஸிக் 5-ஃப்ளோரூராசிலுக்கு மாறுகிறது).

The nearness of marker qualities, particularly anti-microbial opposition, in hereditarily changed plants is of worry in the public eye because of fears related with dangers for the earth and human wellbeing. Formation of transgenic plants that don't contain the outside hereditary material, particularly bacterial and viral root to a great extent eases the strain. Here we utilized the pMF framework containing of the Z. rouxii recombinase R and a CodA-nptII bifunctional selectable quality for produce sans marker transgenic tomato and apple plants conveying the very sweet thaumatinII quality from tropical plant Thaumatococcus daniellii leveled out of E8 quality natural product explicit advertiser and rbsS3A eliminator. We utilized two diverse recombinase enlistments.

Early choice of essential calluses and postponed decsametasone treatment of leafs or petioles of transgenic plants with further choice on 5-FC media. As elective we changed plants by vector conveyed just thaumatin articulation tape with no specific markers. Transgenes for this situation were chosen by PCR investigation of all got regenerants. We have acquired 170 transgenic lines of tomato that have been altogether dissected by PCR. After acceptance of recombinase movement only one completely sans marker transgenic tomato line was gotten. The comparative outcomes were gotten by early determination. Direct change by thaumatinII tape came about two marker free plants as well. We recommend that a fragmented extraction and chromosomal revisions because of the nearness of various and atypical or incomplete T-DNA inclusions happen in different instances of simple change tomato plants.

We additionally have gotten three free transgenic lines of apple that have been altogether dissected by PCR for the nearness of T-DNA successions. We at that point utilized the deferred methodology for the choice of sans marker plants with one checked line contained all pieces of articulation tape. After acceptance of recombinase movement we have gotten more than 30 sublines, the greater part of them lost their protection from kanamycin. PCR and Southern smear examination uncovered that every single unfortunate quality and arrangements between RS destinations were evacuated by recombination process while quality of enthusiasm with administrative components is available in totally acquired plants. Anyway by semi-amount PCR examination we can distinguish articulation of thaumatin quality in most, yet not all came about sublines. Early determination system as immediate change was ineffective for creation marker free apple plants. pMF framework is reasonable for creation without marker apple or other obstinate harvests, as cisgenic tomato plants might be acquired by direct change by quality of intrigue. The examination was subsidized to some degree by an exploration award Nº 14-50-00079 of the Russian Science Foundation.