மருத்துவ மற்றும் பரிசோதனை கண் மருத்துவ இதழ்
திறந்த அணுகல்

சுருக்கம்

மனித கார்னியல் எண்டோடெலியல் செல் தனிமைப்படுத்தலின் தரப்படுத்தல் மற்றும் மனித கார்னியல் எண்டோடெலியல் செல்களுக்கான சாரக்கட்டாக மனித அம்னோடிக் மென்படலத்தைப் பயன்படுத்துதல்

கல்பனா சுரேஷ், ஆலன் மேத்யூ புன்னூஸ், சாரா குருவில்லா மற்றும் தன்வி கண்ணா

குறிக்கோள்கள்: மனித கார்னியல் எண்டோடெலியல் செல்கள் (HCECs) தனிமைப்படுத்தப்படுவதைத் தரப்படுத்தவும் மற்றும் தனிமைப்படுத்தப்பட்ட HCEC களுக்கான சாரக்கட்டுகளாக denuded human amniotic membrane (HAM) ஐப் பயன்படுத்தவும்.
முறைகள்: மனித அம்னோடிக் சவ்வு 60 நிமிடங்களுக்கு 37 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 1.2 யூனிட்/மிலி டிஸ்பேஸ் II ஐப் பயன்படுத்தி மெக்கானிக்கல் ஸ்க்ராப்பிங் செய்யப்பட்டது. கார்னியல் எண்டோடெலியல் மற்றும் டெஸ்செமெட்டின் சவ்வுத் தாள்கள் அறுவை சிகிச்சைக்கு தகுதியற்ற மனித நன்கொடையாளர் சடலக் கண்களில் இருந்து உரிக்கப்படுகின்றன மற்றும் 2 மணிநேரத்திற்கு 37 டிகிரி செல்சியஸ் மற்றும் 5% CO2 கரைசலில் 2 mg/ml கொலாஜனேஸ் II கரைசலில் நொதியாக செரிக்கப்பட்டது. தனிமைப்படுத்தப்பட்ட செல்கள் சப்ளிமெண்ட்ஸுடன் கலாச்சார ஊடகத்தில் மீண்டும் இணைக்கப்பட்டு, எண்டோடெலியல் செல்களை விட வேகமாக ஒட்டிக்கொள்ளும் ஃபைப்ரோபிளாஸ்ட்களை அகற்ற நான்கு மணி நேரம் பூசப்படாத கலாச்சாரப் பொருட்களில் பூசப்பட்டது. முன்முயற்சிக்குப் பிறகு, ஒட்டாத செல்கள் ஜெலட்டின் பூசப்பட்ட உணவுகள் அல்லது வளர்ச்சி காரணிகளுடன் கூடுதலாக OptiMEM மீடியாவில் மறுக்கப்பட்ட அம்னோடிக் சவ்வு மீது விதைக்கப்பட்டன. செல்கள் பின்பற்றுதல் மற்றும் பலகோண உருவவியல் ஆகியவற்றிற்காக நுண்ணோக்கி மூலம் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன.
முடிவுகள்: நீக்கப்பட்ட அம்னோடிக் மென்படலத்தின் நுண்ணோக்கி எபிதீலியல் செல் எச்சங்களைக் காட்டவில்லை. அசெல்லுலார் டெஸ்செமெட்டின் தாள்களுக்குப் பின்னால் உள்ள கார்னியாவின் நொதி செரிமானம், எண்டோடெலியல் செல்கள் தனித்தனியாக மிதக்கும் அல்லது கொத்தாகக் கொண்டு அதிக ஃபைப்ரோபிளாஸ்ட் இல்லாத எண்டோடெலியல் செல் தனிமைப்படுத்துதலுக்கு உதவுகிறது. சில தனிமைப்படுத்தப்பட்ட செல்கள் அம்னோடிக் சவ்வு மீது சாரக்கட்டு மற்றும் அடுத்தடுத்த ஊடக மாற்றங்களின் போது அந்த ஒட்டுதலைத் தக்கவைத்துக் கொள்ள முடிந்தது.
முடிவு: டிஸ்பேஸ்-II என்ற லேசான நொதியைப் பயன்படுத்தி HAM க்கு நீண்டகால சிகிச்சை அளித்தால், சவ்வு குறைகிறது, இது அறுவடை செய்யப்பட்ட கார்னியல் எண்டோடெலியல் செல்களுக்கு வெற்றிகரமான சாரக்கடையாக செயல்படுகிறது. இந்த அணுகுமுறை எண்டோடெலியல் செல் பெருக்கத்திற்கான செலவு குறைந்த மாற்றாகவும் மற்றும் கார்னியல் திசு பொறியியல் ஆய்வுகளுக்கான இன் விட்ரோ மாதிரியாகவும் மேலும் ஆராயப்படலாம்.