என்சைம் பொறியியல்
திறந்த அணுகல்

சுருக்கம்

காந்த கேரியர்களில் அசையாமை மூலம் சைக்ளோடெக்ஸ்ட்ரின் கிளைகோசைல்ட்ரான்ஸ்ஃபெரேஸின் மறுபயன்பாடு

கேட் கிறிஸ்டினா பிளாங்கோ, பிரான்சிஸ்கோ ஜோஸ் டோஸ் சாண்டோஸ், நடாலியா சோசா பெர்னார்டி, மிகுவல் ஜாஃபெலிசி ஜூனியர், ரூபன்ஸ் மான்டி மற்றும் ஜோனாஸ் கான்டீரோ

பிரேசிலின் சாவோ பாலோ மாநிலத்தில் உள்ள மரவள்ளிக்கிழங்கு மாவு ஆலையின் கழிவுநீரில் இருந்து பிரித்தெடுக்கப்பட்ட பேசிலஸ் லெஹென்சிஸிலிருந்து வரும் சிஜிடேஸ், அம்மோனியம் சல்பேட்டுடன் மழைவீழ்ச்சியைப் பயன்படுத்தி ஓரளவு சுத்திகரிக்கப்பட்ட பிறகு அசையாமல் இருந்தது. பகுதியளவு சுத்திகரிக்கப்பட்ட CGTase ஆனது 3-அமினோப்ரோபில்ட்ரிமெத்தாக்சிசிலேன் மூலம் சிலானைஸ் செய்யப்பட்டு குளுடரால்டிஹைடுடன் செயல்படுத்தப்பட்டு, 16.27% மகசூல் மற்றும் ஆரம்ப செயல்பாட்டில் 17.54% இறுதிச் செயல்பாட்டின் விளைவாக காந்தத்தின் ஆதரவில் கோவலன்ட் பிணைப்பு மூலம் அசையாதது. பேசிலஸ் லெஹென்சிஸிலிருந்து சைக்ளோடெக்ஸ்ட்ரின் கிளைகோசைல்ட்ரான்ஸ்ஃபெரேஸின் இயற்பியல் வேதியியல் பண்புகள் மற்றும் இயக்கவியல் தீர்மானிக்கப்பட்டது. அசையாத CGTase இன் உகந்த வெப்பநிலை கரையக்கூடிய நொதியை விட அதிகமாக இருந்தது (முறையே 70°C மற்றும் 55°C). அசையாத நொதியின் உகந்த pH ஆனது கரையக்கூடிய நொதியின் (pH 8.0) போலவே இருந்தது. pH மற்றும் தெர்மோ ஸ்டெபிலிட்டி மதிப்பீடுகளில், 50% என்சைம் செயல்பாடு 24 மணிநேரத்திற்குப் பிறகு பராமரிக்கப்பட்டது மற்றும் 26.22% ஆரம்ப செயல்பாடு முறையே 160 நிமிடங்களுக்குப் பிறகு தக்கவைக்கப்பட்டது. Michaelis-Menten மாறிலி 0.82 mg.ml-1 ஆகவும், அதிகபட்ச வேகம் 45.45 mol.ml−1.min−1 ஆகவும் இருந்தது. நான்கு சுழற்சிகளுக்குப் பிறகு அசையாத நொதியின் மறுபயன்பாடு ஆய்வில், 16.66% ஆரம்ப வினையூக்கி செயல்பாடு பராமரிக்கப்பட்டது, இது காந்தத்தில் அசையாத நொதியை மீட்டெடுக்கும் மற்றும் மீண்டும் பயன்படுத்தும் திறனை நிரூபிக்கிறது.