ஐ.எஸ்.எஸ்.என்: 2161-0401
முகர்ஜியா ஆர், ஷீட்ஸ் ஆர்எல், கிரே ஏஎன் மற்றும் ராபிட் ஜேஎஃப்
இந்த ஆய்வின் நோக்கங்கள், இரண்டு மிகவும் சுத்திகரிக்கப்பட்ட நொதிகளான உருளைக்கிழங்கு ஸ்டார்ச்-சின்தேஸ் (எஸ்எஸ்) மற்றும் ஸ்டார்ச்-பிராஞ்சிங்-என்சைம் (எஸ்பிஇ) ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி, அமிலோபெக்டின் மற்றும் அமிலோஸின் வெவ்வேறு விகிதங்களைக் கொண்ட பத்து மாவுச்சத்துகளின் தொகுப்புகளை விட்ரோவில் பெறுவதாகும். ஒரே மாதிரியான பத்து அமிலோஸ்களைக் கொடுக்க ADP [14C] Glc உடன் SS இன் எதிர்வினையால் அமிலோஸ் முதலில் ஒருங்கிணைக்கப்பட்டது; அமிலோபெக்டின் பின்னர் SBE இன் செயல்பாட்டின் மூலம் பல்வேறு அளவு அமிலோபெக்டின்களுடன் பத்து மாவுச்சத்துக்களைக் கொடுக்க ஒருங்கிணைக்கப்பட்டது. 14C-அமிலோஸ்களில் இரண்டு முறையே 75 மற்றும் 130 வினாடிகளுக்கு 1.0 mIU சுத்திகரிக்கப்பட்ட ஸ்டார்ச்-பிராஞ்சிங்-என்சைம் (SBE) உடன் வினைபுரிந்தன. இரண்டாவது தொகுப்பில், 3 அமிலோஸ்கள் ஆட்டோகிளேவ் செய்யப்பட்டு 15, 45 மற்றும் 75 நொடிகளுக்கு 1.0 mIU உடன் வினைபுரிந்தன. மூன்றாவது தொகுப்பில், 5 அமிலோஸ்கள் ஒவ்வொன்றும் 130 நொடிகளுக்கு 0.50 முதல் 0.01 mIU வரை SBE இன் வெவ்வேறு அளவுகளுடன் வினைபுரிந்தன. 10 தொகுக்கப்பட்ட மாவுச்சத்துக்கள் அமிலோபெக்டின் மற்றும் அமிலோஸ் பின்னங்களாக பிரிக்கப்பட்டன. அமிலோபெக்டின் மற்றும் அமிலோஸ் விகிதங்கள் 99.9% அமிலோபெக்டின் மற்றும் 0.1% அமிலோஸ் முதல் 10% அமிலோபெக்டின் மற்றும் 90% அமிலோஸ் வரை இருந்தன. SS மற்றும் SBE ஆகிய இரண்டு நொதிகளை மட்டுமே பயன்படுத்தி 10 வெவ்வேறு மாவுச்சத்துக்கள் ஒருங்கிணைக்கப்பட்டதாக முடிவுகள் காட்டுகின்றன. ப்ரைமர்கள் எதுவும் ஈடுபடவில்லை. கிளைகோஜன் மற்றும் டிப்ராஞ்சிங் என்சைம்களும் இதில் ஈடுபடவில்லை.