என்சைம் பொறியியல்
திறந்த அணுகல்

சுருக்கம்

பாராஸ்போரின் 2Aa1 இலிருந்து பெறப்பட்ட பெப்டைட்களின் சைட்டோடாக்ஸிக் செயல்பாடு மற்றும் பெருங்குடல் புற்றுநோய் SW480 செல்களுக்கு எதிரான அதன் ஒப்புமைகள்

ஜெனிபர் குரூஸ்

பாராஸ்போரின்-2 (PS2Aa1) என்பது பேசிலஸ் துரிஞ்சியென்சிஸ் தயாரித்த ஒரு நச்சு மற்றும் இது MOLT-4, Jurkat, Sawano மற்றும் HepG2 போன்ற புற்றுநோய் உயிரணுக்களுக்கு எதிராக உயர் சைட்டோடாக்சிசிட்டியைக் காட்டுகிறது. அதன்படி, அதன் சைட்டோடாக்ஸிக் விளைவை விளக்க, பல-படி பொறிமுறை மாதிரி முன்மொழியப்பட்டது: முதலில், PS2Aa1 ஆனது GPI-நங்கூரமிட்ட ஏற்பிகள் அல்லது மென்படலத்தில் உள்ள பிற புரதங்களுடன் பிணைக்கப்படும்; பின்னர், செறிவூட்டப்பட்ட நச்சுகள் ஒலிகோமரைஸ் செய்யப்பட்டன, அதன் பிறகு, டிரான்ஸ்மேம்பிரேன் துளைகள் உருவாகின்றன, சவ்வு ஊடுருவலில் சேதத்தை உருவாக்குகின்றன (1). இருப்பினும், அதன் செயல்பாட்டின் வழிமுறை தெளிவுபடுத்தப்படவில்லை. எனவே, இந்த ஆராய்ச்சிப் பணியில், Fmoc மூலோபாயத்தின் மூலம் PS2Aa1, பெப்டைட்களை ஒருங்கிணைத்து துண்டு துண்டாகச் செய்தோம். P264-G274, Loop1-PS2Aa மற்றும் Loop2-PS2Aa எனப்படும் PS2Aa1 இன் வெவ்வேறு டொமைன்களிலிருந்து பெறப்பட்ட 3 பெப்டைடுகளைப் பெற்றோம். கூடுதலாக, P264-G274 (P264-V268K, P264-V268W, மற்றும் P264-V268H) இன் 3 வழித்தோன்றல்கள், Loop1-PS2Aa (Loop1-Y5K) இன் 1 வழித்தோன்றல் மற்றும் Loop2-PS2Aa இன் 1 வழித்தோன்றல் (Loop4-Na) பெறப்பட்டன. ஒவ்வொரு எச்சத்திலும் ஏற்படும் மாற்றங்கள் சேர்மங்களின் சார்ஜ் மற்றும் ஹைட்ரோபோபசிட்டி அதிகரிப்பால் ஆதரிக்கப்படுகின்றன. பெப்டைட்களின் இரண்டாம் நிலை கட்டமைப்புகள் வட்ட டைக்ரோயிசம் (டிசி) நிறமாலை மூலம் உறுதிப்படுத்தப்பட்டது. PS2Aa1 இன் அனைத்து பெப்டைட்களும் 190 nm இல் அதிகபட்ச உறிஞ்சுதல் இசைக்குழு மற்றும் 205-220 nm க்கு இடையில் இரண்டு குறைந்தபட்ச உறிஞ்சுதல் பட்டைகளுடன் α- ஹெலிக்ஸின் இரண்டாம் கட்டமைப்பை வெளிப்படுத்தின. கூடுதலாக, மனித எரித்ரோசைட்டுகளின் ஹீமோலிசிஸின் அளவு தீர்மானிக்கப்பட்டது, மதிப்பிடப்பட்ட அனைத்து பெப்டைட்களும் 100 µM ஐ விட HC ₅₀ குறைவாக இருப்பதைக் காட்டுகிறது, நேர்மறை கட்டுப்பாட்டுடன் (TX-100 0.1 %) ஒப்பிடும்போது 24% ஹீமோலிசிஸ் குறைவாக உள்ளது. இறுதியாக, முழு பெப்டைடுகள் SW480 க்கு எதிரான செயல்பாட்டை வெளிப்படுத்தின ; 5.716 μM இன் IC _{50 உடன் P264-V268K மிகவும் செயலில் இருந்தது} என்பதை எடுத்துக்காட்டுகிறது . 5-ஃப்ளோரூராசில், கீமோதெரபி மருந்து, ஒரு நேர்மறையான கட்டுப்பாட்டாக எடுத்துக் கொள்ளப்பட்டது . இந்த முடிவுகள் P264-V268K ஆனது SW480 பெருங்குடல் புற்றுநோய் உயிரணுக்களுக்கு பாதுகாப்பான, தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட மற்றும் அநேகமாக ஒரு புதிய செயல்பாட்டு முறையுடன் சிகிச்சையில் சிறந்த திறனைக் கொண்டுள்ளது என்பதை தெளிவாக நிரூபிக்கிறது.