ஜர்னல் ஆஃப் புரோட்டியோமிக்ஸ் & பயோ இன்ஃபர்மேடிக்ஸ்
திறந்த அணுகல்

சுருக்கம்

சீரம் புரோட்டியோமிக்ஸிற்கான இரு பரிமாண பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸின் உகந்த நிலைகள்

ராஜு வி.எஸ்.ராஜாலா

சீரம் புரோட்டியோம் பகுப்பாய்வு நோய் கண்டறிதல் மற்றும் சிகிச்சை கண்காணிப்பில் சாத்தியமான நம்பிக்கைக்குரிய அணுகுமுறையை வழங்குகிறது. இருப்பினும், புரதங்களின் பெரிய டைனமிக் வரம்பு, அதிக அளவு புரதங்கள், அதிகப்படியான உப்பு மற்றும் சீரம் கொழுப்பு ஆகியவை பகுப்பாய்வை மிகவும் சவாலானதாக ஆக்குகின்றன. எனவே, இரு பரிமாண ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் (2-DE) இல் புரதங்களின் கரைப்பை மேம்படுத்துவது மற்றும் பலவிதமான உடலியல் நிலைமைகளின் கீழ் சீரம் புரதத்தை பகுப்பாய்வு செய்யும் திறனை மேம்படுத்துவது அவசியம். இந்த ஆய்வு, மவுஸ் சீரம் 2-DE வரைபடத்தில் பல்வேறு பிஹெச் கொண்ட டிபிளேஷன் ஹைபண்டண்ட் புரோட்டீன், வீழ்படிந்த வழிமுறைகள், சூடான SDS சிகிச்சை மற்றும் IPG கீற்றுகளின் பல்வேறு சேர்க்கைகளின் விளைவுகளை ஆய்வு செய்தது. இறுதியாக புரோட்டியோஎக்ஸ்ட்ராக்ட் TM அல்புமின் அகற்றும் நிரல் மூலம் சீரம் அதிக அளவில் புரதங்களை அகற்றுதல், எத்தனால் மழைப்பொழிவு, 2.5% SDS மற்றும் 2.3% DTT உடன் வெப்பமாக்கல் மாதிரியை 95oC க்கு 3 நிமிடம் குறைக்கவும், மற்றும் pH 4-7 IPG கீற்றுகளில் IEF (17cm) ) 100 ?g குறைக்கப்பட்ட சீரம் புரதங்கள் பொதுவாக பரிந்துரைக்கப்படுகின்றன 2-DE இல் சில்வர் ஸ்டைனிங் மூலம் சீரம் புரோட்டீம் பகுப்பாய்வு, இது குறைந்த அளவிலான புரதங்களின் தீர்மானம் மற்றும் தீவிரத்தை திறம்பட மேம்படுத்தும். மேம்படுத்தப்பட்ட நிலைமைகள், பின்வரும் அடையாளம் காணக்கூடிய சாத்தியமான நாவல் நோய் குறிப்பான்களுக்கான சீரம் மாதிரிகளின் சிறந்த குறிப்பு 2-DE ஜெல்லை உருவாக்க உதவுகின்றன.