Wilson Lewis Mandala1
நோயெதிர்ப்பு தூண்டுதல்களுக்கு செல்-மத்தியஸ்த பதில்கள் பெரும்பாலும் அழற்சி தளங்களில் உள்ளூர்மயமாக்கப்படுகின்றன மற்றும் பல செல் வகைகளை உள்ளடக்கியது. வெளிப்படுத்தப்பட்ட சைட்டோகைன் வகைகளின் அடிப்படையில் இந்த பதில்களை ஒற்றை செல் அளவில் செயல்பாட்டு ரீதியாக வகைப்படுத்தலாம். ஒற்றை செல் அளவில் ஆன்டிஜென்-குறிப்பிட்ட செல் பதில்களை அளவிடும் திறன், நோய் நோய்க்கிருமி உருவாக்கம் பற்றிய ஆய்வுகள் முதல் தடுப்பூசிகளின் மதிப்பீடு வரையிலான பரந்த அளவிலான சாத்தியமான பயன்பாடுகளைக் கொண்ட ஒரு முக்கியமான கருவியாகும். ஆரோக்கியமான வயது வந்த மலாவிய பங்கேற்பாளர்களிடமிருந்து சேகரிக்கப்பட்ட இரத்த மாதிரிகளில் லிம்போசைட்டுகள் மற்றும் மோனோசைட்டுகள் மூலம் விட்ரோ சைட்டோகைன் உற்பத்தியைத் தூண்டுவதற்கான உகந்த நிலைமைகளை நிறுவுவதற்கும், பல்வேறு சைட்டோகைன்கள் மற்றும் உயிரணு வகைகளுக்கான உகந்த கறை நிலைகளை நிறுவுவதற்கும் இந்த ஆய்வில் பல சோதனைகள் மேற்கொள்ளப்பட்டன. வெவ்வேறு தூண்டுதல் முறைகள் மற்றும் நிபந்தனைகள், வெவ்வேறு கலாச்சார குழாய்கள் மற்றும் இன்குபேட்டர்கள் மற்றும் வெவ்வேறு ஆன்டிபாடி லேபிளிங் நிலைமைகள் உகந்த நிலைமைகளை நிறுவுவதற்காக மதிப்பிடப்பட்டன.
PMA மற்றும் Ionomycin பயன்பாடு அதிக சைட்டோகைன்-உற்பத்தி செய்யும் T செல்களை உருவாக்கியது, அதேசமயம் LPS ஆனது சைட்டோகைன் உற்பத்தி செய்யும் மோனோசைட்டுகளுக்கு சிறந்த தூண்டுதலாக இருந்தது. ஐந்து மணிநேரம் முழு இரத்தத்தையும் தூண்டுவது T உயிரணுக்களில் சைட்டோகைன் கண்டறிதலுக்கு உகந்ததாக இருந்தது, அதே சமயம் நான்கு மணிநேரம் மோனோசைட்டுகளுக்கு உகந்ததாக இருந்தது. மோனென்சினை விட BFA சிறந்த கோல்கி பிளாக்கராக இருப்பது கண்டறியப்பட்டது மற்றும் 15ml பால்கன் வகை பாலிப்ரோப்பிலீன் குழாய்களை நிலையான நிலையில் பயன்படுத்துவதன் விளைவாக சைட்டோகைன் உற்பத்தி செய்யும் செல்கள் அதிக விகிதத்தில் கண்டறியப்பட்டது. T செல்கள் முக்கியமாக TNF-α, IFN- மற்றும் IL-2 உற்பத்தியாளர்களாக இருப்பது கண்டறியப்பட்டது, மோனோசைட்டுகள் முக்கியமாக TNF-α மற்றும் IL-6 ஐ உற்பத்தி செய்கின்றன. 2µl எதிர்ப்பு CD3-PerCP, 2µl எதிர்ப்பு CD14-APC மற்றும் 4µl எதிர்ப்பு சைட்டோகைன்-PE ஆகியவை சிறந்த முடிவுகளை விளைவித்தன. மற்ற தொகுதிகளுடன் ஒப்பிடும்போது 2ml FACS லைசிங் கரைசலைப் பயன்படுத்தியபோது அதிக சைட்டோகைன் உற்பத்தி மோனோசைட்டுகள் கண்டறியப்பட்டன. ICS ஐப் பயன்படுத்தி சைட்டோகைன்-உற்பத்தி செய்யும் செல்களின் விகிதத்தை நிர்ணயிப்பதில் இந்த உகந்த நிலைமைகள் அவசியம்.