ஜர்னல் ஆஃப் செல் சயின்ஸ் & தெரபி
திறந்த அணுகல்
ஐ.எஸ்.எஸ்.என்: 2157-7013
ஐ.எஸ்.எஸ்.என்: 2157-7013
அப்புக்குட்டன் என்.ஆர்.பிரதீப், அலெக்ஸாண்டர் ஆசியா மற்றும் புனித் கவுர்
நோக்கம்: கிளாசிக்கல் புரோட்டீன் போக்குவரத்து பாதையில் இருந்து சுயாதீனமான ஒரு பொறிமுறையின் மூலம் செல்களில் இருந்து Hsp72 இன் வெளியீட்டை வெப்ப அழுத்தம் தூண்டுகிறது என்பதை எங்கள் முந்தைய ஆய்வுகள் நிரூபித்துள்ளன. இருப்பினும், எச்எஸ்பி72, ஒரு லீடர்லெஸ் புரோட்டீன், எக்ஸ்ட்ராசெல்லுலர் சூழலுக்கான அணுகலைப் பெறும் சரியான வழிமுறை தெரியவில்லை. பொருட்கள் மற்றும் முறைகள்: இந்த ஆய்வு உள்செல்லுலார் Hsp72 கடத்தல் மற்றும் வெளியீடு நிகழும் பொறிமுறையைத் தீர்மானிக்க வடிவமைக்கப்பட்டுள்ளது. இந்த ஆய்வில் வழங்கப்பட்ட தரவு, மேற்கத்திய ப்ளாட்டிங் மற்றும் ஃப்ளோ சைட்டோமெட்ரியைப் பயன்படுத்தி உள்ளக Hsp72 கடத்தலைப் பரிந்துரைக்கிறது. மேலும், அறியப்படாத சவ்வு பிணைப்பு புரதங்கள் இன்-ஜெல் செரிமானம் மற்றும் LC-MS/MS செய்வதன் மூலம் அடையாளம் காணப்பட்டன. முடிவுகள்: வெப்ப அதிர்ச்சி சிகிச்சைக்கு செல்களை முதலில் வெளிப்படுத்திய 60 நிமிடங்களுக்குள், பிளாஸ்மா சவ்வு பிணைக்கப்பட்ட Hsp72 வெளியேற்றப்பட்டு சைட்டோசோலிக் பெட்டிகளாக மறுபகிர்வு செய்யப்படுகிறது என்பதை நாங்கள் நிரூபிக்கிறோம். Cytochalasin B உடன் செல்களுக்கு முன் சிகிச்சையளிப்பதன் மூலம் செயலில் உள்ள செல் போக்குவரத்தைத் தடுப்பது, பிளாஸ்மா மென்படலத்திலிருந்து சைட்டோசோலுக்கு Hsp72 மறுபகிர்வு செய்வதை முற்றிலுமாக ரத்து செய்தது. Hsp72 உடன் பிளாஸ்மா சவ்வு பிணைப்பு புரதங்களின் குறுக்கு-இணைப்பு மற்றும் வெஸ்டர்ன் பிளட் பகுப்பாய்வு மற்றும் LC-MS/MS பகுப்பாய்வு ஆகியவை நியூக்ளியோலின், Hsp90, gp96, CAP2, TLR2, 4 மற்றும் 7 உட்பட Hsp72 உடன் குறைந்தது ஏழு ஊடாடும் கூட்டாளர்களை வெளிப்படுத்தின. nucleolin-siRNA முற்றிலும் அடிப்படை மற்றும் வெப்ப அதிர்ச்சி தூண்டப்பட்ட Hsp72 வெளியீட்டைத் தடுக்கிறது. முடிவுகள்: ஒன்றாக எடுத்துக்கொண்டால், பிளாஸ்மா சவ்வு Hsp72க்கான நீர்த்தேக்கமாக செயல்படுகிறது என்பதை முதன்முறையாக இந்த ஆய்வு நிரூபிக்கிறது மற்றும் Hsp72 கடத்தல் மற்றும் வெளியீட்டில் நியூக்ளியோலின் முக்கிய பங்கு வகிக்கிறது என்று கூறுகிறது.