ஜர்னல் ஆஃப் செல் சயின்ஸ் & தெரபி
திறந்த அணுகல்

சுருக்கம்

எலிகளில் விந்தணு உருவாக்கத்தின் போது சி-கிட் டிரான்ஸ்ஜீன் கட்டமைப்பின் வடிவமைப்பு மற்றும் மூலக்கூறு தன்மை

ஸ்வானந்த் கோலி, அருண் பி சிகார்வார், முரளி ஆர் பாபு மற்றும் ரெட்டி கேவிஆர்

பிரசவத்திற்கு முந்தைய டெஸ்டிஸில், வேறுபடுத்தப்படாத வகை-A விந்தணு ஸ்டெம் செல்கள் (SSCs) சி-கிட் முன்னிலையில் வகை-B விந்தணு செல்களாக (SGCs) வேறுபடுகின்றன, இது பாலூட்டிகளில் விந்தணுக்களின் போது செல்/நிலை குறிப்பிட்ட முறையில் வெளிப்படுத்தப்படுகிறது. சி-கிட் இறுக்கமான டிரான்ஸ்கிரிப்ஷனல் கட்டுப்பாட்டிற்கு உட்பட்டது, ஏனெனில் இது கிருமி உயிரணுக்களுக்கு மட்டுமல்ல, ஹெமாட்டோபாய்டிக் ஸ்டெம் செல்கள் மற்றும் மெலனோசைட்டுகளின் வளர்ச்சிக்கும் அவசியம். இருப்பினும், சி-கிட் வெளிப்பாடு ஒரு மாறும் ஒழுங்குபடுத்தப்பட்ட செயல்முறையாகும், விந்தணு உருவாக்கத்தின் போது அதன் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷனல் ஒழுங்குமுறைக்கான மூலக்கூறு அடிப்படை பெரும்பாலும் அடையாளம் காணப்படவில்லை. Wv/Wv பிறழ்ந்த எலிகளில் இருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்ட c-Kit எதிர்மறை SSCகளில் சி-கிட் வெளிப்படுத்தும் டிரான்ஸ்ஜீன் கட்டமைப்பை அறிமுகப்படுத்துவது பெறுநரின் எலிகளின் டெஸ்டிஸில் வேறுபடுத்தி காலனித்துவப்படுத்துமா என்பதை தீர்மானிப்பதே ஆய்வின் நோக்கமாகும். இந்த நோக்கத்திற்காக, 4.4 kb c-Kit-ORFGFP எக்ஸ்பிரஷன் கேசட்டைக் கொண்ட 7.4 kb pG1-Kit-ORF-GFP டிரான்ஸ்ஜீன் கட்டமைப்பானது வடிவமைக்கப்பட்டது மற்றும் அதன் இன் விட்ரோ வெளிப்பாடு இம்யூனோஃப்ளோரசன்ஸ் மற்றும் ஃப்ளோசைட்டோமெட்ரி பகுப்பாய்வு மூலம் உறுதிப்படுத்தப்பட்டது. முடிவுகளை ஒப்பிட்டுப் பார்க்க, 1.1 kb (c-Kit புரமோட்டர் மற்றும் ORF இரண்டும் இல்லாதது), 4.1kb (c-Kit புரமோட்டர் இல்லாதது) மற்றும் 1.4 kb (c-kit-ORF இல்லாமை) ஆகிய மூன்று கட்டுப்பாட்டு-GFP கட்டுமானங்களும் வடிவமைக்கப்பட்டுள்ளன. எலக்ட்ரோபோரேஷன் (EP) மூலம் SSC களில் அறிமுகப்படுத்தப்பட்டது. கிருமி உயிரணு மாற்று சிகிச்சை (ஜிசிடி) அணுகுமுறையைப் பயன்படுத்தி புசுல்பான் சிகிச்சை பெற்ற மலட்டுத்தன்மையுள்ள எலிகளின் டெஸ்டிஸில் இந்த எஸ்எஸ்சிகள் அறிமுகப்படுத்தப்பட்டன. சி-கிட்-ஓஆர்எஃப்-ஜிஎஃப்பி டிரான்ஸ்ஜீன் செருகியைச் சுமந்து செல்லும் எஸ்எஸ்சிகள், கட்டுப்பாடுகளுடன் ஒப்பிடும்போது பெறுநரின் எலிகளின் செமினிஃபெரஸ் ட்யூபுல்களில் பிற கிருமி உயிரணுப் பரம்பரைகளில் காலனித்துவப்படுத்தப்பட்டு வேறுபடுத்த முடிந்தது. முடிவில், டெஸ்டிஸ் Wv/Wv விகாரி எலிகள் SSC களின் மக்கள்தொகையைக் கொண்டுள்ளன, இதில் c-Kit சமிக்ஞையின் செயல்பாடு முதன்முறையாக பலவீனமடைந்துள்ளது, பெறுநரின் மலட்டுத்தன்மையுள்ள எலிகளில் SSC களின் செயல்பாட்டை c-Kit அறிமுகத்துடன் மீண்டும் தொடங்கலாம் என்று நாங்கள் தெரிவிக்கிறோம். -ORF-GFP டிரான்ஸ்ஜீன் செருகல். எனவே தற்போதைய கண்டுபிடிப்புகள் இனப்பெருக்க உடலியல் மற்றும் டெஸ்டிகுலர் செயலிழந்த நோயாளிகளுக்கு புதிய எதிர்கால சிகிச்சைகளுக்கான சாத்தியக்கூறுகளைப் புரிந்துகொள்வதில் குறிப்பிடத்தக்க தாக்கத்தை ஏற்படுத்தக்கூடும்.